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蛋白纯化系统主要元部件特点及纯化的原则
发布时间:2017-11-28   点击次数:519次
蛋白纯化系统主要元部件特点:  
主要元部件自精选知名厂商,性能优越,品质可靠。  
泵:原装进口双柱塞杆二元梯度泵,泵头为PEEK材质,前置设计并自带控制面板。  
与蛋白等生物样品具有良好的兼容性,耐强酸、强碱、高盐;  
不仅耐受高压并且在低温低压下具备良好的稳定性,具有优异的输液精度;  
泵头带有自冲洗功能,避免纯化生物样品时,盐等在泵头析出,造成仪器损坏和污染;  
输液泵采用电子压力脉动抑制技术,为蛋白纯化系统提供的梯度精度和重复性,保证纯化结果的重现性;  
检测器:  
紫外检测器为进口DAD检测器,同时提供多个波长的信号输出,可方便实时监测分离组分的纯度;  
各种阀(收集阀、八通阀、柱位阀、进样阀、柱选择阀、电磁阀等)均为知名厂商定制,可根据实际需要选择;  
液路接触部分:包括管路、流通池、动态混合器等,采用PEEK、蓝宝石、红宝石等生物惰性材料,与生物样品具有良好的兼容性。
 
蛋白纯化系统蛋白纯化的一般原则
蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。
每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。
蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速,颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,防止目的蛋白被降解。
精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。
选择性树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力,洗脱峰越窄,柱效越好。仅有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有效分离。

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