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离子交换蛋白纯化系统纤维素的预处理
发布时间:2015-09-06   点击次数:826次
离子交换蛋白纯化系统纤维素的预处理:
  (1)称取5gDE-32,撒在盛有75ml 0.5mol/L HCl的烧杯中,室温放置30min,不时轻轻搅拌。
  (2)将糊状物移入3号砂芯漏斗中,用蒸馏水淋洗。如此重复,每加一次去离子水,浸泡一段时间,再进行抽滤,至洗涤液pH等于4即可(pH试纸试)。
  (3)将糊状物移入烧杯中,加入75ml 0.5mol/L NaOH,放置30min,不时轻轻搅拌,弃去上清液,依同法用0.5mol/L NaOH再处理一次。
  (4)将交换剂移入3号砂芯漏斗中,反复用去离子水淋洗,直至洗涤液pH为8.0(可用pH试纸测试)。
  (5)将DEAE-纤维素浸泡在150ml去离子水中.用0.5mol/L 盐酸把pH调至7.6,滴定可在pH计上进行,须使悬液zui终pH在10min内无变化,然后抽滤。
  (6)将上述滤块置于100毫升量筒中,加入75ml缓冲液I,慢慢搅混之后,静置20min,用倾斜法除去上清液中细微粒子,如此重复若干次,zui后上清液pH与缓冲液I几乎一致。

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