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液相色谱层析系统的系统组成部件
发布时间:2017-10-16   点击次数:503次
液相色谱层析系统的系统组成部件
液相色谱层析系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,液相色谱层析系统主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
 
进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
 
输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。
 
分离系统
液相色谱层析系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm,内径为2~5mm,由"不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相。固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍,或者用化学法偶联各种基因或配体的有机化合物。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。

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